一、采集前準備
實驗前大鼠禁食不禁水 8–12 h，減少血脂、食物殘渣對血清質(zhì)量的干擾。
準備采血管、離心管、采血針、酒精棉、鑷子、止血工具，所有耗材無菌無熱源。
根據(jù)實驗需求選擇采血方式：眼眶靜脈叢采血、腹主動脈采血、心臟采血。
二、常用采血操作規(guī)范
1. 眼眶靜脈叢采血(活體多次采血)
左手固定大鼠，輕壓頸部使眼球充血凸起。
右手持肝素化毛細管或采血針，從內(nèi)眼角刺入靜脈叢，緩慢取血。
采血后用干棉球輕壓眼球止血，避免淤血、溶血。
2. 腹主動脈 / 心臟采血(終末大量采血)
大鼠麻醉后仰臥固定，打開腹腔 / 胸腔，暴露血管。
注射器垂直刺入血管，緩慢勻速抽取血液，避免產(chǎn)生氣泡。
采血完成后快速處死大鼠，減少應(yīng)激對血清指標影響。
三、血清分離關(guān)鍵步驟
血液室溫靜置 30–60 min 自然凝固，不可劇烈震蕩，防止溶血。
離心機參數(shù)：3000–3500 r/min，離心 10–15 min。
小心吸取上層淡黃色上清即為大鼠血清，避免吸到血細胞。
四、溶血與污染預(yù)防
采血動作輕柔，避免暴力穿刺、快速抽拉造成紅細胞破裂溶血。
全程無菌操作，防止毛發(fā)、組織碎屑、細菌污染樣本。
避免血液接觸組織液，保證血清純度。
五、采集后保存要求
新鮮血清短期 4℃保存，長期分裝后置于?20℃或?80℃凍存。
避免反復(fù)凍融，影響蛋白、細胞因子、生化指標穩(wěn)定性。
做好樣本標記，記錄采血時間、大鼠編號、組別信息。
六、實驗注意事項
操作過程減少大鼠應(yīng)激，應(yīng)激會導(dǎo)致激素、炎癥因子異常。
采血速度統(tǒng)一，保證組間樣本一致性。
廢棄血液、耗材按生物安全規(guī)范處理。
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